文献类型： 中文期刊

作者： 张改平 ¹ ; 朱礼倩 ² ; 杨艳艳 ¹ ; 赵绪永 ² ; 乔松林 ² ; 张红 ³ ; 王丽 ¹ ; 李清州 ² ; 王选年 ⁴ ;

作者机构： 1.河南省动物免疫学重点实验室

2.河南农业大学

3.河南教育学院

4.河南科技学院

关键词： 鸡胚成纤维细胞;cDNA表达文库;传染性法氏囊病毒受体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 03 期

页码： 216-219

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小。构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%。从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。