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猪肺炎支原体P46蛋白单克隆抗体制备

文献类型: 中文期刊

作者: 冯志新 1 ; 迟灵芝 2 ; 刘茂军 1 ; 王海燕 1 ; 甘源 1 ; 吴叙苏 1 ; 邵国青 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.山东畜牧兽医职业学院

关键词: 猪肺炎支原体;P46蛋白;单克隆抗体

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2010 年 26 卷 02 期

页码: 320-324

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。制备针对该蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源。本研究取猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,用大肠杆菌表达的P46蛋白作为筛选抗原制备了2株特异性单克隆抗体1A4和3C11。结果显示,2株单抗ELISA效价最高可达1∶64 000。Western-blot结果表明,2株单抗均能与原核表达的P46蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中46 000大小的蛋白发生特异性反应;2株杂交瘤细胞株经3个月冻存或连续传代3个月均能保持较高的滴度。本研究成功制备了2株针对猪肺炎支原体P46蛋白的特异、稳定且高滴度的单克隆抗体。

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