文献类型: 中文期刊
作者: 闫少侠 1 ; 田永祥 1 ; 刘泽文 1 ; 袁芳艳 1 ; 郭锐 1 ; 段正赢 1 ; 杨克礼 1 ; 孟丽 1 ; 周丹娜 1 ;
作者机构: 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 猪流产嗜性衣原体;主要外膜蛋白(MOMP);重组表达
期刊名称: 湖北农业科学
ISSN: 0439-8114
年卷期: 2013 年 52 卷 04 期
页码: 214-217
收录情况: 北大核心
摘要: 根据GenBank中衣原体主要外膜蛋白(MOMP)全基因序列设计特异性引物,以临床分离的衣原体病原中提取的衣原体全基因组为模板,利用特异性引物PCR扩增得到MOMP全基因序列。通过BLAST比对,结果显示其与已提交的猪流产衣原体CG1株的MOMP序列(EU531729)有1个碱基不同。根据对测序结果进行信号肽序列预测及内切酶位点分析,选用BamHⅠ和SalⅠ双酶切将目的蛋白序列克隆到表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-MOMP。将重组质粒转化入E.coli BL21进行表达,表达产物使用镍离子亲和层析柱进行纯化得到目的蛋白rMOMP。目的蛋白经Western-blot检测,证明其具有免疫学活性。
- 相关文献
[1]基于重组外膜蛋白的猪流产嗜性衣原体病抗体ELISA检测方法的建立. 周丹娜,杨克礼,闫少侠,刘泽文,段正赢,郭锐,袁芳艳,刘威,孟丽. 2015
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