文献类型： 中文期刊
作者： 罗志姣 1 ; 蔡为明 2 ; 李南羿 1 ; 吴坤 1 ;
作者机构： 1.河南农业大学生命科学学院
2.浙江省农业科学院园艺所
关键词： 香菇;差异表达;显示体系;银染
期刊名称： 食用菌学报
ISSN： 1005-9873
年卷期： 2009 年 16 卷 01 期
页码： 26-30
收录情况： 北大核心
摘要： 为建立适用于研究香菇(Lentinula edodes)分化中基因表达差异的银染差异显示方法,以香菇突变株fbd1及其出发菌株98411的菌丝体和子实体为材料,采用Trizol法提取总RNA,优化了反转录和PCR扩增中5项反应参数,再经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和银染显示差异条带。试验结果表明,适宜分析香菇mRNA差异的反转录体系中RNA投入量为0.5~1μg、dNTP浓度为20μmol/L,PCR扩增反应MgCl2、dNTP和Taq酶分别为2mmol/L、200μmol/L和1.0U,此条件下,目标条带清晰且重复性好。
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