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雪莲类PEBP基因在大肠杆菌中的表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王志方 1 ; 张学军 2 ; 王博 1 ; 周小云 3 ; 艾秀莲 1 ;

作者机构： 1.新疆农科院微生物应用研究所

2.新疆农科院哈密瓜研究中心

3.新疆农科院核技术生物技术研究所

关键词： 磷脂酰乙醇胺结合蛋白;原核表达;低温诱导;雪莲

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2008 年 24 卷 09 期

页码： 1649-1652

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本实验旨在构建雪莲类PEBP基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化类PEBP基因所编码的蛋白,为进一步研究奠定基础。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到原核表达载体pET30(+)上,转化感受态表达菌株BL21(DE3),低浓度IPTG低温诱导融合蛋白的表达,纯化产物,Western blotting鉴定目的蛋白。IPTG低温诱导PEBP,经SDS-PAGE分析,其相对分子量约为28kD,与预期相符,表达量约占菌体蛋白的26.8%,并且通过亲和层析纯化了重组融合蛋白,Western blotting鉴定为阳性。成功构建了原核表达载体pET-PEBP,获得了高效表达产物,并为进一步研究雪莲类PEBP基因的抗冻功能打下基础。

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