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柑橘黄龙病、裂皮病和衰退病病原的多重RT-PCR检测

文献类型： 中文期刊

作者： 丁芳 1 ; 曹庆 2 ; 王国平 1 ; 易干军 2 ; 钟云 2 ;

作者机构： 1.华中农业大学植物科学技术学院

2.广东省农业科学院果树研究所

关键词： 柑橘;多重RT-PCR;黄龙病;裂皮病;衰退病;检测

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2006 年 33 卷 05 期

页码： 947-952

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立了一种同时检测柑橘黄龙病病原类细菌(CandidatusLiberibacterasiaticus,HLB)、柑橘裂皮类病毒(Citrusexocortisviroid,CEVd)、柑橘衰退病病毒(Citrustristezavirus,CTV)的多重RT-PCR技术体系。运用根据3种病原核苷酸保守区序列设计的特异性引物,成功的对同一样品中的HLB、CEVd、CTV进行多重RT-PCR扩增,得到1160bp、371bp、273bp3条特异性大小与试验设计相符的条带。就影响多重PCR的主要因素引物浓度和退火温度进行了一系列优化,建立了能同时检测HLB、CEVd、CTV的多重RT-PCR技术体系。该体系最低能从10pg总RNA中检测出黄龙病类细菌和柑橘裂皮类病毒,从1pg总RNA中检测到柑橘衰退病毒。对采自田间37份材料的实际检测表明:存在两种或3种病原的复合侵染。

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