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棉花肉桂醇脱氢酶基因的克隆与分析

文献类型： 中文期刊

作者： 倪志勇 1 ; 李波 1 ; 吕萌 1 ; 王娟 1 ; 白岩 1 ; 范玲 1 ;

作者机构： 1.新疆农业科学院核技术生物技术研究所

关键词： 棉花;肉桂醇脱氢酶;基因克隆;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2010 年 25 卷 02 期

页码： 23-29

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。根据棉花纤维特异表达cDNA文库分析得到的肉桂醇脱氢酶基因EST序列设计引物,采用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD5(GenBank登录号为FJ848868)。研究结果表明:GhCAD5全长1488bp,具有一个1068bp的开放阅读框,5′非编码区为140bp,3′非编码区为280bp,编码355个氨基酸,预测分子量约为38.403kDa,等电点为7.67。氨基酸同源性分析发现,GhCAD5与拟南芥AtCAD1和水稻OsCAD4的同源性较高。利用PCR方法克隆了GhCAD5基因的基因组序列,长度为1695bp,包含6个外显子和5个内含子。将GhCAD5的ORF连接于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导,获得了相应蛋白的表达。棉花GhCAD5基因的克隆为进一步研究其生物学功能和应用奠定了基础。

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