文献类型： 中文期刊
作者： 周胜花 1 ; 贺东昌 1 ; 张李俊 1 ; 陈立栋 2 ;
作者机构： 1.山西省农业科学院畜牧兽医研究所
2.Institute of Radiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences
关键词： HIV-TAT蛋白转导域;TAT-EDAG融合蛋白;原核表达;造血干细胞
期刊名称： 生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2006 年 022 卷 004 期
页码： 598-603
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： HIV-TAT蛋白转导域(PTD)是新近发现的一种在蛋白转导过程中能高效穿过生物膜的结构域,它能将与之连接的多肽、蛋白质及DNA等分子跨膜导入几乎所有的组织和细胞,转导效率高而对细胞没有损伤.构建了TAT-EDAG、TAT-GFP融合蛋白原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中实现了两种融合蛋白的可溶性原核表达,在非变性条件下进行蛋白纯化,获得了纯度在90%以上的融合蛋白.脱盐处理后,利用TAT-GFP转染体外培养的鼠成纤维细胞证实了TAT转导肽的生物活性;利用TAT-EDAG转染体外培养的HL-60细胞,Western blotting分析表明:TAT-EDAG可以导入HL-60细胞中.这为下一步应用于体外造血干细胞扩增研究奠定了基础.
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