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猪细小病毒VP_2的原核表达及间接ELISA方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 臧科伟 1 ; 张春玲 2 ; 邹勇 2 ; 柴家前 2 ; 崔言顺 2 ;

作者机构: 1.山东农业大学动物医学院

2.山东农业大学动物医学院;上海市农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 猪细小病毒;VP2基因;ELISA

期刊名称: 西南农业学报

ISSN: 1001-4829

年卷期: 2008 年 21 卷 05 期

页码: 1416-1418

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 含有猪细小病毒结果蛋白VP2基因的重组质粒pET32c-VP2,转入表达宿主菌BL21中,通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,重组VP2蛋白高效表达,以包涵体形式存在,经变、复性和纯化后,Western blot显示有良好的生物活性。纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最佳包被浓度为3.1μg/mL;血清最佳稀释度为1∶100,阳性标准初步定为OD待检血清≥0.4且OD待检血清/OD标准阴性值≥2.1。

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