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鳗鲡疱疹病毒ORF95基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李友娟 1 ; 葛均青 1 ; 宋铁英 1 ; 林天龙 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词： 鳗鲡疱疹病毒;ORF95;基因克隆;原核表达

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2012 年 27 卷 08 期

页码： 787-791

摘要： 鳗鲡疱疹病毒(Anguillae herpesvirus,AngHV)是淡水鳗鲡的主要病毒性疾病病原之一。根据鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)的基因组序列(GenBank:NC-013668)设计引物,扩增鳗鲡疱疹病毒福建株(AngHV-FJ)ORF95基因的开放阅读框序列,克隆至pMD19-T载体;经限制性内切酶酶切和测序鉴定,进一步将其克隆至原核表达载体pET-32a,构建了表达质粒32a-ORF95,将其转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导,实现了ORF95在大肠杆菌中的高效表达。在0.1mmol.L-1 IPTG、23℃诱导14h的条件下,可溶性ORF95蛋白的表达量较高,经镍柱纯化获得了高纯度的融合蛋白。

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