文献类型： 中文期刊

作者： 周俊明 ¹ ; 倪艳秀 ¹ ; 范宝超 ¹ ; 祝昊丹 ¹ ; 朱雪蛟 ¹ ; 王丹丹 ¹ ; 胡屹屹 ¹ ; 李彬 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： 非洲猪瘟病毒;p30蛋白;氨基酸序列片段;反应原性

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2024 年 40 卷 010 期

页码： 1875-1881

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性，探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,经IPTG诱导、Ni柱纯化、透析后，获得p30蛋白氨基酸序列中8～101 aa片段(P-1#)、58～101 aa片段(P-2#)、101～158 aa片段(P-3#)、8～194 aa片段(P-4#),用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析p30蛋白氨基酸序列中不同片段与p30蛋白免疫兔血清和ASFV阳性猪血清的反应原性。结果显示，上述片段均获得诱导表达及纯化，表达形式有可溶性表达(P-1#、P-3#)和包涵体表达(P-2#、P-4#)。各片段以1.0 mg/L包被时，p30免疫兔血清与p30蛋白氨基酸序列中4种片段均能发生免疫反应，ASFV阳性猪血清与P-4#、P-1#反应较佳，与P-3#反应中等，与P-2#反应最弱。综上，p30蛋白氨基酸序列中不同片段反应原性的差异为认识p30抗原优势区域提供了数据，这将有助于非洲猪瘟血清学诊断抗原的科学筛选。