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NO自由基对猪圆环病毒2型复制的体外抑制作用研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李基棕 1 ; 张冬霞 1 ; 李丽 1 ; 薛涛 1 ; 刘传敏 1 ;

作者机构： 1.临沂大学药学院;江苏省农业科学院兽医研究所兽医诊断检测重点实验室农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： NO;NO自由基(NO·);猪圆环病毒2型(PCV2);抑制

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2019 年 03 期

页码： 924-930

收录情况： 北大核心

摘要： 试验旨在探讨NO自由基(NO·)对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的抑制作用。硝普钠(SNP)和抗坏血酸(VC)联合加入培养基中可产生NO·,而单独使用SNP产生NO的形式为NO~+。本研究采用MTT法测定药物的细胞毒性,通过Griess反应测定供体药物产生NO的水平。分别用SNP、VC、SNP+VC和对照药物乙酰青酶胺(NAP)处理PK-15细胞,6 h后接种1 MOI的PCV2病毒液,72 h后收获培养上清和细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blotting分析、病毒效价和实时荧光定量PCR试验检测病毒增殖水平。结果显示:SNP、VC和SNP+VC对PK-15细胞的最大安全浓度分别为500、62.5和31.25μmol/L;60μmol/L SNP和30μmol/L SNP+30μmol/L VC两种供体产生的NO量极显著高于非药物处理组和对照药物NAP处理组(P<0.01);与阳性对照组相比,60μmol/L SNP+30μmol/L VC处理组中的PCV2毒价和DNA拷贝数极显著下降(P<0.01),且PCV2 Cap蛋白的表达也受到明显抑制,而SNP和VC单独处理组上述指标无显著变化(P>0.05)。以上结果表明,SNP+VC产生的NO·对PCV2增殖有显著抑制作用,SNP产生的NO~+不影响PCV2增殖,NO体外抑制PCV2增殖主要是通过NO·实现。

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