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中国明对虾鳃细胞全长cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王维新 1 ; 史成银 1 ; 黄倢 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 中国明对虾(Fenneropenaeuschinensis);鳃细胞;全长cDNA文库

期刊名称： 海洋水产研究

ISSN： 1000-7075

年卷期： 2004 年 25 卷 05 期

页码： 7-12

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用SMART (SwitchingMechanismat 5’endofRNATranscript)技术 ,以同源重组的方式构建了中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库。首先用RNA提取试剂盒从中国明对虾鳃细胞中提取总RNA ,以总RNA为模板 ,CDSⅢOligo(dT)为引物 ,反应一段时间后 ,再加入转换模板 (Switchingtemplate) ,反转录合成cDNA第 1链。在DNA聚合酶的作用下 ,通过长距离PCR ,扩增双链DNA。双链cDNA经凝胶过滤柱纯化后 ,与线性化的 pGADT7 Rec质粒载体同源重组 ,转化感受态AH10 9酵母菌株后 ,得到中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库。经测定该文库的容量为 2 1× 10 6 ,扩增后文库的滴度为 7 3× 10 7cfu/ml。经菌落PCR测定 ,该文库的重组率为 90 %。

  • 相关文献

[1]瓦氏雅罗鱼鳃细胞系的建立及其耐碱生长特性初探. 徐悦,梁利群,孙博,常玉梅. 2023

[2]氟苯尼考3种不同给药方式在中国明对虾体内的药代动力学研究. 李静云,李健,王群,战文斌. 2006

[3]基于SAMPL的一种微卫星筛选方法在中国明对虾中的尝试. 张留所,孔晓瑜,喻子牛,孔杰,相建海. 2006

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