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杜梨胆碱单加氧酶基因克隆及胁迫表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李慧 1 ; 丛郁 2 ; 常有宏 1 ; 蔺经 1 ; 盛宝龙 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院园艺研究所

2.中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室

关键词: 杜梨;胆碱单加氧酶;基因克隆;表达特点

期刊名称: 西北植物学报

ISSN: 1000-4025

年卷期: 2012 年 32 卷 06 期

页码: 1093-1098

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了解梨砧木—杜梨对非生物胁迫的防御机制,采用RT-PCR、RACE和长片段PCR技术从杜梨幼苗中获得1个甜菜碱合成相关的胆碱单加氧酶基因(PbCMO),运用生物信息学方法分析序列特点,并通过跨内含子引物进行半定量RT-PCR研究其在非生物胁迫下的表达情况。结果表明:(1)PbCMO基因cDNA序列编码区长1 227bp,编码由408个氨基酸组成的多肽。其对应基因组DNA序列长2 928bp,由10个外显子和9个内含子组成。其推导的多肽预测的等电点为6.19,相对分子质量为46.27kD,具备Rieske型铁硫[2Fe-2S]簇结合区域和非血红素单核态铁配位点序列,与枸杞CMO蛋白相似性最高(71%)。(2)PbCMO在幼苗根和叶中均为诱导型表达,100mmol/L氯化钠、10%(W/V)聚乙二醇、180mmol/L甘露醇或20μmol/L脱落酸处理后其表达量明显上调,表明PbCMO对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA均存在表达响应,可能参与杜梨应对非生物胁迫的转录调节。

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