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适合AFLP分析用的节瓜基因组DNA提取方法的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 程志学 1 ; 陈清华 1 ; 于远 1 ; 王瑞 1 ; 黄河勋 1 ; 林毓娥 1 ; 梁肇均 1 ;

作者机构: 1.广东省农科院蔬菜研究所

关键词: 节瓜;DNA提取;CTAB法;AFLP

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2009 年 7 卷 02 期

页码: 420-424

收录情况: CSCD

摘要: 本研究以CTAB法为基础,采用以下5种处理提取节瓜叶片基因组DNA:A、PVPP(3%)+抗坏血酸(100mmol/L);B、β-巯基乙醇(3%)+抗坏血酸(100mmol/L);C、PVPP(3%)+半胱氨酸(5%);D、PVPP(3%)+β-巯基乙醇(3%);E、抗坏血酸(100mmol/L)+半胱氨酸(5%)。实验结果表明:在5种处理中,C处理提取的DNA质量最高,其溶液呈无色透明状,经核酸蛋白仪测定其OD260/OD280为1.8~2.0;经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,节瓜叶片基因组DNA带型清晰、完整、无降解,蛋白、多糖、酚类及RNA等去除比较彻底;经AFLP分析,酶切彻底,PCR扩增后的带型清晰稳定,重复性好,说明C处理提取的节瓜基因组DNA完全满足AFLP分析的要求。

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