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多重RT-PCR检测猪流感病毒及血清亚型

文献类型： 中文期刊

作者： 刘惠莉 1 ; 周宗清 1 ; 邢继兰 1 ; 潘洁 1 ; 杨秋峰 1 ; 饶柏忠 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室

关键词： 猪流感病毒;血凝素亚型;神经氨酸酶亚型;多重RT-PCR

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2008 年 28 卷 11 期

页码： 1262-1265

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank登录的猪流感病毒各血清亚型NP基因,H1、H3亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因核苷酸序列,经DNAstar软件类比选择保守区设计引物,sPCR筛选出引物对,用于扩增猪流感病毒NP基因、血凝素H1/H3亚型、神经氨酸酶N1/N2亚型基因片段。根据NP、H1N1、H3N2亚型引物扩增片段大小和反应条件的差异,将各引物配比组合,形成引物组合,建立多重RT-PCR体系。经对不同亚型模板的扩增、检验,建立的2个多重RT-PCR体系可用于猪流感病毒及H1/H3血凝素亚型、N1/N2神经氨酸酶亚型的快速鉴别、诊断。特异性试验检测多重RT-PCR不能扩增其他猪病毒核酸,核酸的最低检测量达0.2ng。采集临床具有呼吸道症状的猪肺、鼻腔棉试子等85份,与鸡胚分离及血凝/血凝抑制试验比较,阴性样品检测符合率达100%。

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[1]多重PCR检测禽流感病毒血清亚型的研究. 刘惠莉,邢继兰,周宗清,陈波,潘洁. 2006

[2]多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒. 陈芳,刘惠莉,孙红立,曹祥荣,李震,赵立平. 2005

[3]出口家禽新城疫病毒PCR和ELISA联合检测方法的建立. 蒋凤英,李春华,王英,周宗清,张春玲,邹勇,何锡忠,张婉华,刘晨. 2008

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[10]猪流感病毒分离株的特性及致病性. 哈卓,张鹏超,李倩,师小潇,饶柏忠,刘永杰,刘惠莉. 2013

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[14]猪流感病毒分离株A/Swine/Zhejiang/1/2007遗传特性分析. 张鹏超,师小潇,潘洁,饶柏忠,刘惠莉. 2010

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