文献类型： 中文期刊

作者： 沈思思 ¹ ; 冯万宇 ¹ ; 陈亮 ¹ ; 兰世捷 ¹ ; 李丹 ¹ ; 张蕾 ¹ ; 周景明 ¹ ; 刘雪松 ¹ ; 张国华 ¹ ; 王欢 ¹ ; 王岩 ¹ ; 刘文 ¹ ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院

关键词： 腺病毒;呼吸道合胞病毒;支原体;冠状病毒;四重PCR

期刊名称： 现代畜牧科技

ISSN： 2095-9737

年卷期： 2025 年 003 期

页码： 5-8

摘要： 为建立一种可同时检测牛腺病毒3(BAdV-3)、牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）、溶血性曼氏杆菌（MH）和牛冠状病毒（BCoV）的四重PCR方法，根据Genbank公布的BAdV-3、BRSV、MH和BCoV基因保守序列设计了特异性引物4对，通过对退火温度和引物浓度的筛选，并验证了其特异性、敏感性和重复性，建立了能够同时检测BAdV-3、BRSV、MH和BCoV的四重PCR方法，初步应用于临床。结果显示，最佳退火温度为54℃，最佳引物浓度为0.5μmol/L；其特异性结果显示四重PCR只能检出BAdV-3、BRSV、MH和BCoV 4种病原体，对BAdV-3、BRSV、MH和BCoV最低检出限分别为1.67×10～4、1.58×10～4、1.75×10～3、1.29×10～3copies/μL，建立的四重PCR对40份临床样本进行检测，结果与单一PCR检测结果一致。结果表明，该研究建立的四重PCR方法可用于BAdV-3、BRSV、MH和BCoV的流行病学调查。