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Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 李小宇 1 ; 张正坤 2 ; 王秋华 3 ; 张春雨 4 ; 张淋淋 4 ;

作者机构: 1.宁夏大学资源环境学院

2.吉林省农业科学院

3.吉林省农业科学院植物保护研究所东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室东北农业大学植物保护学院吉林农业大学农学院吉林省白山市抚松县第五中学

4.吉林省农业科学院植物保护研究所东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室东北农业大学植物保护学院吉林农业大学农学院

关键词: CbxR基因;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体

期刊名称: 生物技术

ISSN: 1004-311X

年卷期: 2015 年 04 期

页码: 320-323

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]克隆CbxR基因,进行原核表达,纯化CbxR基因蛋白并制备其多克隆抗体。[方法]CbxR基因克隆至原核表达载体p ET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达并纯化,Western blot鉴定分析。制备CbxR蛋白的兔源多克隆抗体,运用间接ELISA方法检测多抗效价,利用Western blot印记检测抗体特异性。[结果]成功获得CbxR基因,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导可大量表达,成功制备CbxR蛋白兔源多克隆抗体,效价为1∶64 000,经Western blot检测表明多克隆抗体特异性良好。[结论]多克隆抗体为CbxR检测及进一步研究CbxR基因功能奠定了基础。

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