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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 王志红 1 ; 张改平 2 ; 郭军庆 2 ; 李青梅 2 ; 王寅彪 2 ; 陈稳 2 ; 王爱萍 1 ;

作者机构: 1.郑州大学生物工程系

2.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;GP5蛋白;单克隆抗体

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2012 年 41 卷 06 期

页码: 150-153

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)的单克隆抗体,利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)GP5重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和NS0浆细胞瘤细胞进行融合,经间接ELISA和阻断ELISA筛选、有限稀释法克隆化获得3株能稳定分泌抗PRRSV GP5蛋白单克隆抗体的(mAb)杂交瘤细胞株,命名为4B7、2C5和2E4。间接免疫荧光(IFA)和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)结果显示,3株mAb均与感染PRRSV BJ 4株的Marc 145细胞特异性反应,表明其可识别天然病毒蛋白。mAb的Ig亚类均为IgG1,细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1∶256和1∶51 200,Western blot分析表明,mAb均特异性识别PRRSV GP5蛋白。

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