文献类型： 中文期刊
作者： 张雨良 1 ; 黄启星; 张树珍; 王健华; 余乃通; 刘志昕;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： 高梁花叶病毒;Hcpro;CP;PIPO;酵母双杂交;诱饵载体;Sorghum mosaic virus; Hcpro; CP; PIPO; Yeast two-hybrid; Bait vector
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2012 年 33 卷 012 期
页码： 2252-2256
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用同源克隆技术获得侵染甘蔗高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的Hcpro、cP、PIPO基因片段。将该基因片段连接至pGBKT7载体,分别构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Hcpro、pGBKT7-CP和pGBKT7-PIPO,经PCR、酶切及测序鉴定,证明重组诱饵载体构建成功后,将重组质粒导人Y2HGold酵母菌株.检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-m营养缺陷平板上生长良好,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性。含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Leu、SD/-Trp/-Ade和SD/-Trp/-His营养缺陷平板上不能生长,表明重组诱饵质粒表达产物对ADE2、HIS3报告基因无自激活作用。研究结果为下一步利用酵母双杂交系统检测与高梁花叶病毒Hcpro、CP、PIPO蛋白相互作用的甘蔗蛋白提供基础。
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