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转座子诱变生防枯草芽胞杆菌B-916及抗真菌活性相关基因的克隆

文献类型： 中文期刊

作者： 陈志谊 1 ; 刘永锋 1 ; 张杰 2 ; 刘邮洲 1 ; 王晓宇 1 ; 聂亚锋 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

2.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

关键词： 枯草芽胞杆菌;转座子;脂肽类抗生素;功能基因

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 04 期

页码： 186-192

收录情况： 北大核心

摘要： 生防枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)B-916对水稻纹枯病有很好的防治效果。研究报道了采用转座子诱变技术从8500个突变株中筛选到3株抗水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)下降的突变株。PCR验证了转座子插入到了突变株基因组DNA中。虽然突变株相对B-916的生长速度,生物量和最终活菌数没有显著差异;但培养液对水稻纹枯病菌毒力和溶血性能显著下降。HPLC分析表明,B-916分泌的脂肽类抗生素与伊枯草素保留时间不同;突变株M-1、M-2和M-3相对B-916产生脂肽类抗生素发生显著变化。反向PCR克隆转座插入位点周边序列及测序结果表明,转座突变的基因与编码脂肽类化合物合成和调控相关的malonylcoenzyme A transacylase、lipopeptide synthetase B和sensor histidine kinase蛋白基因具有高度同源性。通过基因步行法实验已克隆到插入位点全长基因,分别命名为BacD,BacD和Degs,递交到GenBank,接受序列号为FJ192262和FJ194461。进一步进行了生物信息学分析发现,B-916编码lipopeptide synthetase B基因与目前已报道的相应基因存在低同源性区域。

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