文献类型： 中文期刊

作者： 卢超 ¹ ; 何银生 ¹ ; 艾伦强 ¹ ; 刘海华 ¹ ; 周武先 ¹ ; 段媛媛 ¹ ; 程天周 ¹ ; 张美德 ¹ ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院中药材研究所湖北省农业科技创新中心中药材分中心;恩施程丰农业综合开发有限公司

关键词： ISSR;道地药材;白术;体系优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2018 年 22 期

页码： 7423-7428

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了得到适宜的咸丰白术ISSR反应体系,采用两轮U12(62×4)均匀设计的方法,对ISSR反应中各组分设置不同的梯度,分析反应体系各组分用量对扩增结果的影响。结果表明,在18μL的ISSR反应体系中,引物0.29μmol/L,2×Taq Master Mix 9.6μL,模板DNA 47 ng时,扩增条带较清晰,多态性好。根据得到的优化体系,进一步开展白术的引物筛选,并从中得到了9条扩增条带相对清晰稳定、多态性较好的引物。对筛选的多态性引物开展了温度梯度PCR实验,发现温度对ISSR-PCR扩增结果影响显著。本实验通过采用均匀设计的方法,降低了常规体系优化实验所需次数,节省了时间和试剂的用量,为快速建立ISSR反应体系和后续咸丰白术遗传多样性分析提供了便利与帮助。