文献类型： 中文期刊

作者： 王宁 ¹ ; 傅洪拓 ¹ ; 乔慧 ¹ ; 吴滟 ² ; 龚永生 ² ; 蒋速飞 ² ; 熊贻伟 ² ;

作者机构： 1.南京农业大学无锡渔业学院

2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

关键词： 青虾;眼柄;RNA提取

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2011 年 27 卷 03 期

页码： 378-382

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了找到最适合青虾眼柄总RNA抽提的方法,本试验先后使用RNAiso Plus、RNeasy Mini Kit、Unizol等产品抽提青虾眼柄总RNA并在方法上进行了改良,通过电泳、紫外分光光度计和RT-PCR对总RNA进行检测和分析。结果表明RNAiso法抽提的RNA色素含量高;改良RNAiso法抽提的RNA有部分降解,含色素少,对反转录酶有一定的抑制作用但不影响RT-PCR;RNeasy Mini Kit能有效去除抑制反转录酶活性的色素且RNA无降解,但DNA污染严重;RNAiso结合RNeasy Mini Kit法和Unizol结合RNeasy Mini Kit法提取的RNA均无DNA污染,也没有抑制反转录酶活性的色素,但后者所提的RNA完整性好。因此,Unizol结合RNeasy Mini Kit法最适合青虾眼柄总RNA的提取,可获得高质量的RNA用于RT-PCR、cDNA文库构建、定量PCR等实验。