文献类型： 中文期刊

作者： 王春枝 ¹ ; 李忠 ² ; 梁宏伟 ³ ; 王丹 ⁴ ; 吴奎 ⁵ ;

作者机构： 1.武汉理工大学

2.中国建筑科学研究院

3.中国水产科学研究院长江水产研究所

4.中国刑警学院

5.华中农业大学水产学院

关键词： 鲢;低氧胁迫;ATP酶;δ亚基;克隆;组织表达

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2014 年 21 卷 03 期

页码： 454-463

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究线粒体ATP酶F1-δ基因在鲢(Hypophthalmichthys molitrix)中的作用,采用RACE-PCR技术克隆出该基因全长,应用半定量RT-PCR法检测该基因在不同组织的表达,应用实时荧光定量PCR法检测急性低氧胁迫过程中不同溶氧浓度下该基因的组织表达变化。结果显示,鲢线粒体ATP酶F1-δ基因全长762 bp,开放阅读框480 bp,编码159个氨基酸残基,5′端非编码区114 bp,3′端非编码区168 bp。鲢与斑马鱼(Danio rerio)线粒体F1-δ编码氨基酸序列的相似性最高,达到89%;与大西洋鲑(Salmo salar)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)、樱花钩吻鲑(Oncorhynchus masou formosanus)、红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)的相似性分别为76%、75%、74%、69%;半定量RT-PCR结果显示,该基因在鲢心脏、脑、肝、脾和肌肉中均有表达,且心脏中最高,肌肉次之;实时荧光定量PCR结果表明,水中溶解氧(DO)分别为5.6(对照组)、4.38、3.37、2.11、1.12和0.54 mg/L时,随着溶解氧浓度的下降该基因在心脏中的表达逐渐下降且均显著低于对照组(P<0.05);而在脑、肝、脾和肌肉中的表达则先升高后降低。寡霉素抑制法测得低氧胁迫过程中,鲢心脏等组织中F1F0-ATP酶活性均先升高后降低。这表明鲢线粒体ATP酶F1-δ基因在低氧胁迫中起到一定的作用,并对ATP酶的合成产生影响。