文献类型： 中文期刊

作者： 邢国珍 ¹ ; 孙帅 ¹ ; 李旭 ¹ ; 邱睿 ² ; 程琨 ¹ ; 李博 ¹ ; 陈佳敏 ¹ ; 何雷 ³ ; 李淑君 ² ; 郑文明 ¹ ;

作者机构： 1.河南农业大学生命科学学院

2.河南省农业科学院烟草研究所黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室

3.中国烟草总公司河南省公司

关键词： 烟草;拟茎点霉;特异性引物;分子检测

期刊名称： 烟草科技

ISSN： 1002-0861

年卷期： 2022 年 012 期

页码： 19-24

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为实现烟草拟茎点霉的快速准确检测，利用真菌rDNA-ITS通用引物对拟茎点霉和其他10种烟草病原菌基因组DNA进行了PCR扩增、片段回收及DNA测序，在序列比对基础上设计了两对特异性检测引物，并鉴定了引物的检测灵敏度和特异性，同时优化建立了PCR反应体系。结果表明，在退火温度为60℃时，两对特异性引物P2F/P3R和P3F/P3R从烟草拟茎点霉DNA样本中分别扩增出来420 bp和381 bp的特异性条带，而在其他10种烟草病原菌DNA以及阴性对照中均不能扩增到任何条带。两对特异性引物的检测灵敏度均达到10 pg/μL。建立的基于两对特异性引物P2F/P3R和P3F/P3R的分子检测方法可实现对病原菌烟草拟茎点霉的快速准确检测。