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双须骨舌鱼抗缪勒氏管激素基因amh的克隆、组织表达分析和原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 王且鲁 1 ; 刘奕 1 ; 宋红梅 1 ; 汪学杰 1 ; 刘超 1 ; 牟希东 1 ; 胡隐昌 1 ; 罗建仁 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词: 双须骨舌鱼;抗缪勒氏管激素;克隆;表达分析;原核表达

期刊名称: 水产学报

ISSN: 1000-0615

年卷期: 2016 年 40 卷 12 期

页码: 1801-1812

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为探究双须骨舌鱼抗缪勒氏管激素基因amh的作用和表达模式,本研究通过RACE技术克隆了双须骨舌鱼amh基因全长c DNA序列,发现存在amh1、amh2两个亚型(Gen Bank登录号KU378662、KU378663)。序列分析结果显示,双须骨舌鱼amh1基因的c DNA全长2277 bp,编码623个氨基酸,amh2基因c DNA全长2181 bp,编码355个氨基酸。同源性分析显示,amh基因保守性较低,双须骨舌鱼与同科的美丽硬仆骨舌鱼相似度最高,为85.64%,与不同科鱼类的相似度均低于42%。系统进化分析显示,该基因与骨舌鱼目聚为一支,与鲱形目、鲤形目等较低等的硬骨鱼类亲缘关系较近,与双须骨舌鱼进化地位相符。用荧光定量PCR检测的结果显示,amh基因在双须骨舌鱼不同组织中均有表达,其中amh1亚型在精巢中表达量最高,且明显高于卵巢和其他组织;amh2亚型也在精巢中表达量最高,且明显高于其他组织,但远远低于amh1在精巢中的表达。构建了原核表达载体p ColdⅠ-amh1和p ColdⅠ-amh2并在大肠杆菌中成功诱导出大小分别为68和48 ku的融合蛋白,为进一步研究amh在双须骨舌鱼体内的生物功能奠定了基础。

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