文献类型： 中文期刊

作者： 陈彦 ¹ ; 陶美君 ¹ ; 史宝 ¹ ; 王成刚 ² ; 薄万军 ¹ ; 李文龙 ¹ ; 晏科文 ¹ ; 赵新宇 ¹ ;

作者机构： 1.海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海洋渔业与可持续发展重点实验室青岛海洋科技中心海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

2.海阳市黄海水产有限公司

关键词： 星康吉鳗;促卵泡激素β亚基(fshβ);基因鉴定;序列特征分析;可溶性表达

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2025 年 46 卷 005 期

页码： 158-170

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)在鱼类配子发生早期阶段发挥重要的调控作用。通过同源克隆获得星康吉鳗(Conger myriaster) fshβ基因的编码序列(CDS)，利用生物信息学软件分析该基因编码蛋白的结构与特征，采用原核表达系统对FSH蛋白进行可溶性表达。克隆获得fshβ的CDS区为378 bp，编码125个氨基酸。对序列特征进行分析，fshβ存在保守性较强的GHB(由19～122位的104个氨基酸组成)结构域，相对分子质量为13.19 kDa，理论等电点为6.00，为亲水性蛋白。fshβ的前1～19个氨基酸为信号肽，无跨膜区；存在2个N-糖基化位点、3个O-糖基化位点和14个磷酸化位点，主要定位于细胞核。fshβ的二级结构主要含有α-螺旋(12.0%)、β-折叠(24.8%)、无规则卷曲(63.2%)；其三级结构与日本鳗鲡(Anguilla japonica)、美洲鳗鲡(A. rostrata)、欧洲鳗鲡(A. anguilla)、花鳗鲡(A. marmorata)的fshβ的三级结构较为相似。多序列比对及系统发育树分析显示，星康吉鳗fshβ与日本鳗鲡、美洲鳗鲡、欧洲鳗鲡、花鳗鲡具有较高的同源性，为68.50%～70.08%。构建了重组表达载体pET-28a-FSH，转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中，以IPTG作为诱导剂进行了诱导表达。经SDS-PAGE鉴定，发现fshβ重组蛋白主要在上清液中表达，分子量大小与预期一致。采用亲和层析纯化的方法获得了纯度较高的重组fshβ蛋白。经Western Blot检测显示，在约26.0 kDa处有特异性条带，表明fshβ重组蛋白成功表达。本研究成功克隆星康吉鳗fshβ，并对其序列特征进行生物信息学分析；利用原核表达系统成功表达fshβ重组蛋白，对后续探究星康吉鳗fshβ的调控机制及功能奠定基础，同时对星康吉鳗人工繁育技术的发展提供了新思路。