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猪圆环病毒2型ORF2基因片段的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 祁艳华 1 ; 王爱萍 1 ; 李学伍 2 ; 游雷鸣 1 ; 史平玲 1 ; 胡峰 2 ; 张改平 2 ;

作者机构： 1.郑州大学

2.河南省农业科学院

关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2基因;克隆;原核表达

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2010 年 39 卷 03 期

页码： 112-115

收录情况： 北大核心

摘要： 为在原核表达系统中表达猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因片段,提取感染PCV2的细胞基因组DNA,PCR扩增ORF2基因片段并克隆至pMD-18T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定后,将该基因重组至pET-28a原核表达载体,构建了表达载体pET-28a-ORF2。该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1mmol/LIPTG于37℃诱导5h得到最佳表达。表达重组蛋白的分子量为26.0kD,以包涵体形式存在。Western-Blot分析表明,该重组蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。

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