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二斑叶螨cDNA文库的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 张道伟 1 ; 曾燕玲 1 ; 魏福伦 1 ; 周德贵 2 ;

作者机构： 1.遵义师范学院生命科学学院/贵州省赤水河流域植物资源保护与应用研究特色重点实验室

2.广东省农科院水稻研究所

关键词： 二斑叶螨;cDNA文库;滴度;重组效率

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2013 年 40 卷 10 期

页码： 149-151

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究二斑叶螨发育相关基因的功能,利用TRIzol试剂提取二斑叶螨总RNA,通过SMART技术构建cDNA文库。利用SMART IVTMOligonucleotide和CDSIII/3′PCR Primer为引物,在反转录酶作用下,合成cDNA第1链,利用LD-PCR方法合成cDNA第2链。合成的双链cDNA经酶切回收后,再连接pDNR-LIB载体,转化大肠杆菌感受态细胞Trans 5α,检验库容量和重组效率,并采用PCR方法检测插入cDNA片段的大小。结果表明,构建的二斑叶螨cDNA文库的库容量为3.54×106CFU/mL,重组效率达95.8%,插入片段长度在0.3~2.0 kb之间。构建的二斑叶螨cDNA文库质量良好,能够为进一步研究二斑叶螨基因的功能奠定基础。

  • 相关文献

[1]丁氟螨酯对二斑叶螨生长发育的影响. 谭德龙,廖伟涛,郑苑,郑锦荣,张长远,张宝鑫,李敦松. 2021

[2]阿维菌素亚致死剂量对虚伪新小绥螨的影响. 宋子伟,张宝鑫,邓彩凤,李敦松. 2014

[3]巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析. 杨子平,李辉亮,郭冬,彭世清. 2013

[4]柔嫩艾美耳球虫裂殖子全长cDNA文库的构建及应用. 王园园,陈佳,覃宗华,吴彩艳,廖申权,戚南山,吕敏娜,孙铭飞,蔡建平. 2012

[5]蓝塘猪骨骼肌组织全长cDNA文库的构建. 蔡更元,广东省农科院畜牧研究所,陈瑶生,王翀,李加琪,彭国良,刘敬顺. 2006

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