文献类型： 中文期刊

作者： 李宁求 ¹ ; 余露军 ² ; 付小哲 ² ; 刘礼辉 ² ; 林强 ² ; 常藕琴 ² ; 石存斌 ² ; 黄志斌 ² ; 吴淑勤 ² ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部渔药创制重点实验室,广东省免疫技术重点实验室

关键词： 鳗鲡;迟缓爱德华氏菌;菌蜕;条件优化

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2012 年 36 卷 11 期

页码： 1754-1762

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 菌蜕具有完整细菌表面抗原结构,可诱导机体的体液和细胞免疫应答,成为疫苗制备的候选之一,为了探讨鳗鲡迟缓爱德华氏菌菌蜕疫苗的可行性,实验采用基因重组技术构建了噬菌体PhiX174裂解酶基因(Lysis E)的温控表达载体,转化迟缓爱德华氏菌,成功制备其菌蜕,并对菌蜕形态、溶菌动力学、裂解效率以及制备条件等进行了研究。结果表明,细菌菌蜕表面形成溶菌孔道,细胞因内容物流失而发生明显的皱缩;构建的迟缓爱德华氏菌诱导后1 h开始裂解,5 h后裂解基本完成,裂解效率为99.99%,冷冻干燥后重悬涂布平板,未检出活菌,电镜观察表明冻干前后细胞形态未见明显变化;构建的迟缓爱德华氏菌分别在OD600值为0.4和0.6进行诱导,其裂解过程和裂解效率没有明显区别;分别用LB、BHI、NB 3种培养基进行比较研究,其中LB培养基制备的菌蜕细胞较完整、裂解完全,是制备迟缓爱德华氏菌菌蜕最优培养基。本研究成功构建了鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕,并对其制备条件进行了优化,为鳗鲡爱德华氏菌病疫苗开发奠定了基础。