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催乳素和瘦素对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白及乳蛋白合成信号通路关键因子基因表达的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 杜瑞平 1 ; 王春艳 1 ; 张兴夫 1 ; 高民 1 ;

作者机构： 1.内蒙古农牧业科学院动物营养与饲料研究所

关键词： 催乳素;瘦素;奶牛乳腺上皮细胞;乳蛋白基因;信号通路因子

期刊名称： 动物营养学报

ISSN： 1006-267X

年卷期： 2015 年 27 卷 12 期

页码： 3920-3930

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 在奶牛乳腺上皮细胞原代培养条件下研究了催乳素(prolactin)和瘦素(leptin)对主要乳蛋白与乳蛋白合成信号通路关键因子基因表达的影响。采用胶原酶消化法进行乳腺上皮细胞原代培养,并通过细胞形态观察、生长曲线测定及特异性基因表达对所培养细胞进行鉴定。试验分为4个处理,瘦素浓度均为100 ng/m L,催乳素浓度分别为0、0.1、1.0、10.0μg/m L,每个处理6个重复。首先采用噻唑蓝(MTT)法测定了催乳素和瘦素对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响,然后采用实时定量PCR测定了主要乳蛋白[α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、β-乳球蛋白(β-LGB)]及Janus激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活子5(STAT5)、哺乳动物雷帕霉素靶分子(m TOR)信号分子基因表达量。结果表明,瘦素一定浓度(100 ng/m L)基础上,与0μg/m L催乳素处理相比:0.1和1.0μg/m L催乳素对乳腺上皮细胞有显著的促增殖作用(P<0.05);0.1与10.0μg/m L的催乳素均显著降低了αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白、β-LGB的基因表达量(P<0.05);而1.0μg/m L催乳素处理对αs1-酪蛋白、κ-酪蛋白、β-LGB均有显著的促进表达效应(P<0.05);各催乳素添加处理均显著促进了JAK2基因的表达(P<0.05),而对STAT5和m TOR基因表达只有1.0μg/m L催乳素处理有显著促进效应(P<0.05)。结果提示,培养液含瘦素100 ng/m L基础上,催乳素对乳蛋白及信号通路关键因子基因表达有促进作用,但浓度限制在一定范围(0.1~1.0μg/m L),过高或过低都会呈现抑制效应。瘦素100 ng/m L与催乳素1.0μg/m L对部分乳蛋白基因及乳蛋白合成相关基因表达有显著的促进作用,且通过调控信号转导因子JAK2、STAT5与m TOR基因表达,从而影响乳蛋白基因的表达。

  • 相关文献

[1]瘦素的研究进展. 王林枫,卢德勋,孙海洲,珊丹,赵秀英,杨改青. 2004

[2]瘦素及其生理功能概述. 王春艳,杜瑞平,张兴夫,高民. 2012

[3]奶牛乳腺上皮细胞三维培养的形态观察. 王秀美,考桂兰,高爱武,侯先志,高民. 2009

[4]奶牛乳腺上皮细胞不同代数对乳蛋白基因表达的影响. 韩亚南,侯先志,考桂兰,王秀美,杨金丽,高爱武,杨银芬,赵青,高民. 2012

[5]三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白基因表达的影响. 王秀美,侯先志,敖长金,高民,考桂兰,高爱武,兰儒冰,塔娜. 2013

[6]奶牛乳腺上皮细胞的二维和三维培养及培养后酪蛋白基因的表达. 王秀美,侯先志,高爱武,考桂兰,高民,李大彪,兰儒冰,张楠,张艳明,黄清瑞. 2012

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