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沙拉沙星单克隆抗体制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 刘儒彪 1 ; 胡骁飞 2 ; 张改平 2 ; 王慧 1 ; 王方雨 2 ; 刘璐 1 ; 刘玺 1 ; 邓瑞广 2 ; 宋照军 1 ;

作者机构: 1.河南科技学院

2.河南省农业科学院

关键词: 沙拉沙星;单克隆抗体;杂交瘤细胞;免疫学特性

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2016 年 31 卷 02 期

页码: 87-91

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星(Sarafloxacin,SARA)单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1∶128 000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1∶512 000,IC_(50)为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×10~8L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。

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