文献类型： 中文期刊
作者： 刘在东 1 ; 于德才 1 ; 白艳菊 1 ; 高艳玲 1 ; 徐凤花 2 ;
作者机构： 1.黑龙江省农业科学院
2.东北农业大学
关键词： PVY;一步RT-PCR;检测试剂盒
期刊名称： 中国马铃薯
ISSN： 1672-3635
年卷期： 2008 年 22 卷 01 期
页码： 14-18
摘要： 马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)对马铃薯的危害最大,可导致马铃薯退化,降低马铃薯产量。解决这一问题的重要途径就是培养脱毒种薯,但是否完全脱毒需要经过检测才能证实。本研究依据PVY CP基因序列设计合成了一对引物PY1、PY2,以带毒样品植物总RNA为模板,在同一个反应中同时加入反转录和PCR反应所需试剂,反应程序中包括反转录和PCR反应所需条件,进行反应扩增,带毒样品扩增得到340 bp的目的条带,而健康对照无此目的条带,从而建立了PVY的一步RT-PCR检测技术,并组装成试剂盒。该试剂盒具有良好的稳定性和特异性,灵敏度可以检测到带毒植物组织下限的6.25μg,高于ELISA(100μg)和NASH(15μg)的灵敏度,虽然和常规方法的灵敏度相同,但更为快速、简便、易于操作,适合脱毒苗和脱毒种薯生产单位做大量样品的检测。
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