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水稻愈伤特异性启动子POsCSPpro在花生愈伤中的功能鉴定及碱基编辑效率分析

文献类型: 中文期刊

作者: 薛璐璐 1 ; 李晓娜 2 ; 罗丹丹 3 ; 刘涵 3 ; 渠鹏宇 3 ; 黄冰艳 2 ; 韩锁义 2 ; 董文召 2 ; 石磊 2 ; 张新友 1 ;

作者机构: 1.沈阳农业大学农学院

2.河南省农业科学院河南省作物分子育种研究院/农业部黄淮海油料作物重点实验室/河南省油料作物遗传改良重点实验室/花生遗传改良国家地方联合工程实验室/河南生物育种中心有限公司

3.郑州大学农学院

关键词: 花生;愈伤特异性启动子;POsCSPpro;脱靶效应;GUS报告基因;碱基编辑

期刊名称: 中国油料作物学报

ISSN: 1007-9084

年卷期: 2025 年 47 卷 005 期

页码: 1091-1099

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: CRISPR/Cas9基因编辑系统的脱靶问题是研究者们一直以来的重点关注问题,采用愈伤特异性启动子驱动Cas9蛋白能够降低编辑株系成苗后的脱靶风险。为有效降低脱靶效应,本研究克隆了一个源自水稻的愈伤特异性启动子POsCSPpro,研究了其在花生愈伤中的表达活性及碱基编辑效率。GUS组织化学染色结果表明,该启动子在花生愈伤中具有活性。选择AhALS2基因第190位氨基酸P190为靶点,以该启动子驱动胞嘧啶脱氨酶和nCas9蛋白,构建碱基编辑载体并转化花生,对该启动子的编辑效率进行检验。结果表明,POsCSPpro驱动的胞嘧啶碱基编辑器在花生中具有编辑活性,编辑效率为3.6%。

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