文献类型： 中文期刊
作者： 李晓慧 1 ; 王从彦 2 ; 张四普 1 ; 常高正 1 ;
作者机构： 1.河南省农业科学院园艺研究所
2.河南农业大学生命科学学院
关键词： 西瓜;SRAP;程序优化;体系优化
期刊名称： 安徽农业科学
ISSN： 0517-6611
年卷期： 2007 年 35 卷 27 期
页码： 49-51
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 建立适宜西瓜DNA的SRAP-PCR扩增体系,为西瓜基因图谱的构建和分子标记打下基础。以西瓜中华拳王品种为试验材料,探索了西瓜SRAP-PCR反应程序,并对西瓜SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行梯度实验,筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应程序和体系。最佳SRAP-PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1min,共5个循环;94℃变性1 min,50℃退火1 min,72℃延伸1 min,共35个循环;72℃延伸5 min;4℃保存。最佳SRAP-PCR反应体系(15μl)为:DNA 100 ng,dNTPs 0.3 mmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,primer 7.5 pmol/L,Taq polymerase 0.75 U。该程序和体系能很好地满足西瓜基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于西瓜遗传研究是可行的。
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