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猪葡萄球菌脱落毒素ExhC基因的克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 张乐宜 1 ; 吴坚文 1 ; 蔡汝健 1 ; 李艳 1 ; 蒋智勇 1 ; 刘燕玲 1 ; 宋长绪 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室

关键词: 猪葡萄球菌;Exh C基因;原核表达

期刊名称: 动物医学进展

ISSN: 1007-5038

年卷期: 2014 年 09 期

页码: 34-38

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究猪葡萄球菌表皮脱毒素Exh C基因的分子特征及其原核表达产物的免疫学活性,利用PCR技术从猪葡萄球菌广东增城分离株(GDZC株)扩增出表皮脱落毒素Exh C基因,测序与序列比较分析显示,其编码区全长为837bp,编码279个氨基酸,与国内外猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌表皮脱落毒素Exh C基因的核苷酸同源性、氨基酸同源性均为100%。将Exh C基因克隆于pET-28a(+)表达载体中,经测序正确后,重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定和Western blot分析。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量大小约为32ku,与预期大小一致。Western blot分析表明,Exh C重组蛋白能与猪葡萄球菌GDZC株的阳性血清发生特异性反应,说明表达的GDZC株Exh C重组蛋白具有良好的免疫学活性。

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