文献类型： 中文期刊

作者： 张爱菊 ¹ ; 刘士力 ¹ ; 刘金殿 ¹ ; 张根芳 ¹ ; 周志明 ¹ ;

作者机构： 1.浙江省淡水水产研究所中国水产科学研究院东海水产研究所浙江研究中心农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省淡水水产遗传育种重点实验室;金华职业技术学院

关键词： 三角帆蚌;SERCA;克隆;基因表达;钙刺激

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2019 年 04 期

页码： 545-555

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RACE技术,从三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)鳃组织中成功克隆得到一种肌浆网Ca~(2+)-ATP酶(sarco/endoplasmic reticulum calcium ATPase,SERCA)基因的全长cDNA序列,共3 326 bp,包含201-bp 5’-UTR区域、3 060-bp编码框(ORF)和65-bp 3’-UTR。ORF共编码1 019个氨基酸,预测无信号肽。该基因氨基酸序列呈现出典型的Ca~(2+)-ATP酶特征,由Cation_ATPase_N、E1-E2_ATPase、Hydrolase、Cation_ATPase_C四种类型结构域组成,其内含SERCAs的常见结构组成包括磷酸化区域、异硫氰酸荧光素位点、FSBA结合位点、受磷蛋白结合区以及毒胡萝卜素位点。分析显示,该基因序列高度保守且与海洋软体动物具有最高同源性。荧光定量PCR检测,该基因在三角帆蚌外套膜、斧足、鳃、肝胰腺、性腺等5个组织中均有表达,且在鳃、外套膜、肝胰腺组织中表达较高。不同Ca~(2+)浓度处理试验的结果表明,随水体中Ca~(2+)浓度逐渐升高,该基因在外套膜中的表达水平呈先下降后上升趋势,并在Ca~(2+)浓度为60 mg·L~(-1)时达到最低值,80 mg·L~(-1)时达到最高值。同时在60 mg·L~(-1) Ca~(2+)浓度条件下,外套膜中SERCA基因的表达量随时间推移先上升,并于48 h时达到最高,而后逐渐下降。上述结果为进一步深入研究SERCA基因的功能及其调控机理奠定了基础。