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表达重组鸡新城疫病毒免疫原蛋白基因的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 刘惠莉 1 ; 刘洪云 1 ; 曹殿军 2 ; 孙凤萍 1 ; 顾庆国 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

2.黑龙江省哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室

关键词： 鸡新城疫病毒;重组禽痘病毒;噬斑筛选;Southern杂交

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 1999 年 03 期

页码： 62-65

收录情况： CSCD

摘要： 以 Ｎ Ｄ Ｖ Ｈ Ｎ 基因重组禽痘病毒载体与禽痘病毒转染液为材料，以载体质粒的 Ｌａｃ Ｚ报告基因为筛选标记，在含有 Ｘｇａｌ的培养基上筛选蓝色空斑的阳性重组子，对初次筛选到的蓝色空斑经过三轮蚀斑纯化（蓝斑形成率达９０％ 以上），得到了能稳定增殖的病毒子；再分别提取病毒子感染细胞、正常对照细胞基因组 Ｄ Ｎ Ａ， Ｂａｍ ＨⅠ酶切后，以 Ｄ Ｉ Ｇ 标记的探针进行 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交检测，发现重组病毒感染的细胞基因组 Ｄ Ｎ Ａ 在７ ｋｂ 处有一 Ｄ Ｎ Ａ 片段，能与 Ｈ Ｎ 特异性探针呈阳性反应，而对照细胞没有，从而利用 Ｌａｃ Ｚ报告基因、 Ｈ Ｎ 探针杂交检测，我们成功地筛选并获得了 Ｎ Ｄ Ｖ Ｈ Ｎ 基因重组禽痘病毒，为下一步的研究工作奠定了基础。

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