文献类型: 中文期刊
作者: 李永清 1 ; 姚四新 2 ; 韦莉 1 ; 杨汉春 3 ;
作者机构: 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
2.河南职业技术师范学院
3.中国农业大学动物医学院
关键词: AIV;M2基因;OE-PCR
期刊名称: 中国兽医杂志
ISSN: 0529-6005
年卷期: 2004 年 40 卷 05 期
页码: 6-9
收录情况: 北大核心
摘要: 根据禽流感病毒 (AIV ) A/ Chicken/ Korea/ MS96 / 96 (H9N2 )株的核苷酸序列 ,设计并合成引物 ,通过 RT- PCR,从AIV H9N1株感染的 MDCK细胞总 RNA中扩增出 2 94 bp的 AIV全长的 M2基因。通过软件分析其序列中的跨膜区后 ,将其与p GEM- T easy载体连接产物 p GEM- T/ M2为模板 ,通过 PCR扩增出约 90 bp左右 M2的膜外区编码序列和约 16 0 bp左右 M2的胞内区编码序列。将两个扩增产物同时作为模板 ,以 OE- PCR(overlap extension- PCR)扩增出约 2 5 0 bp的缺失跨膜区的 M2基因M2 d。测序结果表明 ,M2 d的序列除在跨膜区以 4个甘氨酸序列替代外 ,其余部分与 M2完全一致 ,由此说明 OE- PCR扩增法成功地将禽流感病毒 M2基因跨膜区缺失
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