文献类型： 中文期刊

作者： 朱丹丹 ¹ ; 江世贵 ¹ ; 黄建华 ¹ ; 周发林 ¹ ; 杨其彬 ¹ ; 姜松 ¹ ; 杨丽诗 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院南海水产研究所农业农村部南海渔业资源开发利用重点试验室;上海海洋大学水产与生命学院;中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地

关键词： 斑节对虾;性腺组织;性腺细胞;原代细胞培养;CCK细胞活力检测法;MAPK信号通路

期刊名称： 水产科学

ISSN： 1003-1111

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 163-172

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过观察不同成分培养基及不同培养方法培养的斑节对虾性腺组织及细胞原代培养生长情况,分析细胞活力及生长相关基因表达情况,判断3种改良培养基的适用条件,为进一步细胞培养试验提供支持。试验结果表明,以L-15培养基为基础培养基,不同配方的培养效果差距较大,其中机械分离法可成功培养离体斑节对虾性腺组织,而酶解法与3号培养基结合效果较好;在培养过程中可见离体卵母细胞多呈悬浮生长,部分可见分裂相,离体精原细胞多呈贴壁生长,1号、2号培养基中的细胞可维持良好生长状态达一周以上;CCK测试结果表明,机械分离的性腺组织和酶解法分离的性腺细胞分别在1号、3号培养基中有更高的细胞活力,而2号培养基中的性腺组织及细胞在两种培养方法下的活力差别不大。进一步的荧光定量PCR检测了离体培养过程中MAPK信号通路相关基因的表达变化情况,结果表明,Ras、c-Mos、MEK1、ERK基因在卵母细胞中表达变化更显著,且c-Mos基因与离体细胞生长发育情况呈正相关。本试验系统性地筛选了适宜斑节对虾性腺组织、细胞的原代培养方法,为了解培养过程中的生理过程变化提供了相关参考数据。