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检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 孙敏华 1 ; 郭建伟 1 ; 李林林 1 ; 董嘉文 1 ; 邝瑞欢 1 ; 吴玄光 2 ; 张建峰 1 ; 胡奇林 3 ; 张春红 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所

2.华南农业大学兽医学院

3.福建农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鸭坦布苏病毒;NS1蛋白;ELISA

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2017 年 01 期

页码： 37-40

摘要： 为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法。棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1:200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:16000倍稀释时反应条件最佳。在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467。用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6%和10%,显示该方法具有很好的稳定性。用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5%,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100%。该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础。

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