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磺胺二甲氧嘧啶单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 刘宣兵 1 ; 鲁晓翠 1 ; 张改平 1 ; 杨小保 2 ; 侯玉泽 3 ; 邓瑞广 1 ; 刘庆堂 1 ; 职爱民 1 ; 宋春美 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.河南新乡市牧野区畜牧局

3.河南科技大学食品与生物工程学院

关键词: 磺胺二甲氧嘧啶;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2008 年 22 卷 05 期

页码: 195-200

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 用重氮化法将SDM(磺胺二甲氧嘧啶)偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-SDM和包被原OVA-SDM,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌SDM mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SDM mAb;对SDM mAb的效价、亲和性、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,BSA-SDM人工抗原制备成功,分子结合比约为1∶12.1;筛选出1B43、D9、4E1共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶3.2×102、1∶5.12×102、1∶8.1×102,腹水分别为1∶2.56×105、1∶2.56×1051、∶5.12×105,4E1亲和常数(Ka)为1.25×1010L/mol;4E1株对SDM的IC50为16.64ng/ml,与磺胺-6-甲氧嘧啶交叉反应率为5%,与其他磺胺类药物无交叉反应性。本试验获得了抗SDM高价、敏感、特异的mAb,可用于SDM残留检测的免疫学试验。

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