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猪流行性腹泻病毒在稳定表达猪ACE2基因的IPEC-J2细胞中的增殖研究

文献类型： 中文期刊

作者： 沈海燕 1 ; 康桦华 1 ; 刘志成 1 ; 张建峰 1 ; 张春红 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部兽药与诊断学科群广东科学观测实验站/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室

关键词： 猪小肠上皮细胞;血管紧张素转换酶2;猪流行性腹泻病毒;增殖

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2020 年 005 期

页码： 38-43

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得稳定表达猪源血管紧张素转换酶2(ACE2)的细胞株,用以增殖猪流行性腹泻病毒(PEDV).构建了稳定表达猪源ACE2的猪小肠上皮细胞系(IPEC-J2),并对PEDV在该细胞上的增殖进行了分析.将重组表达质粒pCMV3-porcine-ACE2-GFP转染至IPEC-J2细胞后,经潮霉素B筛选和单克隆细胞培养,获得IPEC-J2-ACE2细胞系.通过荧光定量RT-PCR和Western blot对单克隆细胞中ACE2基因的mRNA转录和蛋白表达水平进行鉴定.以PEDV-WH株感染IPEC-J2-ACE2细胞,通过间接免疫荧光试验和荧光定量RT-PCR检测发现,PEDV-WH株在IPEC-J2-ACE2细胞中比在IPEC-J2细胞中的增殖能力高.

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