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猪PEDV与PDC_OV二重RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 孔维欢 1 ; 王晶晶 1 ; 万鹏程 1 ; 石国庆 1 ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

关键词： PEDV;PDCOV;RT-PCR;临床诊断

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2018 年 11 期

页码： 205-209

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在建立能同时检测出猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪丁型冠状病毒(Porcine delta corona virus,PDCOV)的二重RT-PCR检测方法。根据GenBank已收录发表的PEDV和PDCOV基因序列设计2对特异性引物,首先运用RT-PCR反应技术,通过PEDV和PDCOV病毒的目的基因的单项扩增,对反应条件进行优化。然后通过特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测验证确定二重RT-PCR方法的建立。结果显示,目的基因PEDV-M扩增的片段大小是750 bp,PDCOV-N扩增的片段大小是372 bp;能够同时检测出PEDV和PDCOV目的基因,却检测不到PRV、CSFV、PPV三种病毒;体系优化扩增PEDV-PDCOV混合核酸浓度下限为100 pg/μL;能够初步诊断出临床疑似病毒感染的病例。结果表明,成功的建立PEDVPDCOV二重RT-PCR检测方法,此方法敏感性高、特异性强,是一种能够快速有效的检测出猪PEDV-PDCOV单病毒感染或多病毒混合感染的临床诊断方法。

  • 相关文献

[1]猪PEDV与PDC_OV二重RT-PCR检测方法的建立. 孔维欢,王晶晶,万鹏程,石国庆. 2018

[2]绵羊血浆游离DNA提取及SRY基因检测. 蒋立斌,张云生,杨永林,杨华,石国庆. 2013

[3]温州市瓯海地区汉坦病毒的分子流行病学调查. 段正秀,谭有将,熊海萍,陈化新,张永振,郑金海. 2009

[4]扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin部分片段克隆及不同体节mRNA转录水平分析. 叶倩,马勋,薄新文,王正荣,张艳艳. 2015

[5]犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 杨井泉,韩猛立,朱艳平,黄新,薄新文. 2011

[6]扩展莫尼茨绦虫膜联蛋白B3基因组织表达差异分析. 王正荣,赵文娟,王新华,薄新文. 2011

[7]疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的诊断报告. 黄新,康立超,韩猛立,何延华,钟发刚,薄新文. 2011

[8]大豆花叶病毒的组织印迹与RT-PCR检测. 战勇,喻德跃. 2010

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