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黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 谢茂芳 1 ; 薛保国 1 ; 吴坤 2 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院

2.河南农业大学

关键词： 黑曲霉;果胶裂解酶;重组PCR;原核表达

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2013 年 42 卷 01 期

页码： 88-91

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据NCBI上果胶裂解酶(PL)基因在黑曲霉基因组上的分布特点设计特异引物,通过重组PCR扩增出黑曲霉编码PL的结构基因。将PL基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-PL,转化大肠杆菌(E.coli)BL21后,用IPTG进行诱导表达。结果表明,PL基因片段序列全长1 431bp,与已知PL基因(XM_001397206.2)核苷酸和氨基酸序列同源性均为99%。表达产物经12%SDS-PAGE电泳,得到了一条大小约为50kD的条带,与预期分子量相符,证明真菌PL基因在E.coli BL21中可以有效表达。

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