文献类型: 中文期刊
作者: 高博 1 ; 邓柳红 2 ; 易小平 2 ; 张春发 3 ;
作者机构: 1.海南大学生命科学与农学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所
2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
3.辽宁省蚕业科学研究所
关键词: BT cry3Aa;AcNPV polyhedrin;重组;表达
期刊名称: 中国生物工程杂志
ISSN: 1671-8135
年卷期: 2008 年 S1 期
页码: 65-69
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的:将cry3Aa基因与斜纹夜蛾多角体蛋白(AcNPV Polyhedrin)基因重组,构建重组蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:首先以PHT305a载体质粒DNA为模板,PCR扩增cry3Aa基因。再以PET30a-ph-1a载体质粒DNA为模板,PCR扩增多角体蛋白基因。将两基因片段分别连入PMD18-T克隆载体,测序鉴定。表达载体的构建分为两步,先将SacI和XhoI双酶切下来的cry3Aa基因连入表达载体pET30a,再将PMD18T-Ph经BglⅡ和SacI双酶切,所获得的ph基因片段与具有BglⅡ/SacI末端的pET30a-cry3Aa相连接,构建表达载体pET30a-cry3Aa-ph,表达载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白表达并纯化,SDS-PAGE分析结果。结果:cry3Aa和AcNPV Polyhedrin基因序列与报道完全一致。1mmol/LIPTG诱导4h表达的外源蛋白,经SDS-PAGE分析显示在大约103kDa处有表达产物特异条带。结论:获得cry3Aa与polyhedrine基因的重组蛋白工程菌株,为此基因应用于杀虫剂奠定了基础。
- 相关文献
[1]植物抗病基因的进化. 庄军,刘志昕. 2004
[2]菜豆金色花叶病毒属病毒的研究进展. 冯细华,郭安平,陈绵才. 2008
[3]小麦TaNAC5基因克隆及表达分析. 胡伟,颜彦,韦运谢,铁韦韦,候晓婉. 2014
[4]LEAFY同源基因研究进展. 吕玲玲,孙光明,刘玉革,魏长宾,刘胜辉,段俊. 2011
[5]果实成熟软化的分子生物学研究进展. 贾志伟,张鲁斌,高豪杰,李俊俊,李雯. 2012
[6]木薯MeSnRK2-1基因克隆及表达分析. 颜彦,丁泽红,铁韦韦,吴春来,胡伟. 2018
[7]沙田柚果实肿基因的克隆及其表达分析. 陈娇,袁德保,谭琳,李奕星,李芬芳,郑晓燕,郑丽丽,金志强. 2013
[8]甘蔗己糖转运蛋白基因ShHXT6的亚细胞定位及表达. 马晓雯,赵婷婷,王俊刚,张树珍,杨本鹏. 2016
[9]龙眼多聚半乳糖醛酸酶基因DlPG1表达模式与幼果脱落关系研究. 吴建阳,刘丽琴,石胜友,李伟才,郑雪文,魏永赞. 2017
[10]橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 陈章权,吴坤鑫,梁晓东,黄震,陆田田. 2008
[11]沙田柚果实PIP基因的克隆及其表达分析. 陈娇,袁德保,谭琳,李奕星,李芬芳,郑晓燕,郑丽丽,金志强. 2013
[12]香蕉不同器官中microRNA差异表达分析. 王静毅,武耀廷,刘菊华,贾彩红,苗红霞. 2016
[13]木薯中miR393的RT-PCR鉴定及前体的克隆与结构分析. 叶可勇,杨成龙,李瑞梅,符少萍,郭建春. 2011
[14]菠萝果实发育相关RFD1基因的克隆及表达. 王尉,张秀梅,谢江辉. 2011
[15]茄科植物中HCT基因家族的鉴定及进化和表达分析. 李倩,盖江涛,白蓓蓓,叶秀旭,王鹏. 2019
[16]巴西橡胶树一个编码含有C2结构域蛋白cDNA的克隆及表达分析. 马佛明,李辉亮,郭冬,彭世清. 2010
[17]二穗短柄草2C型蛋白磷酸基因BdPP2C1的克隆及表达分析. 颜彦,胡伟. 2014
[18]巴西橡胶树两个蔗糖合成酶基因的克隆和表达分析. 朱家红,徐靖,畅文军,张治礼. 2014
[19]莱茵衣藻缺铁应答调控基因femu2p-C2H2的融合表达与纯化. 吴小霞,邓晓东,任大明,费小雯. 2012
[20]芥子酶的研究概况. 李定琴,张家明. 2007
作者其他论文 更多>>
-
杀鱼爱德华氏菌新型抗酸系统GadBCD的抗酸作用与致病作用
作者:高博;宫春光;舒艾梅;张杉杉;李静林;胡永华
关键词:杀鱼爱德华氏菌;谷氨酸脱羧酶系统;抗酸性;致病作用
-
杀鱼爱德华氏菌新型毒力因子研究进展
作者:李静林;宫春光;舒艾梅;张杉杉;高博;胡永华
关键词:杀鱼爱德华氏菌;水产致病菌;新型毒力因子;毒素-抗毒素系统
-
罗非鱼格氏乳球菌的分离鉴定、致病性及耐药性
作者:张杉杉;莫坤联;李静林;高博;冼健安;胡永华
关键词:罗非鱼;格氏乳球菌;分离鉴定;致病性;耐药性
-
基于GEE和Landsat时间序列数据的海南岛土地利用分类研究
作者:戴声佩;易小平;罗红霞;李海亮;李茂芬;郑倩;胡盈盈
关键词:GEE;Landsat;土地利用;海南岛
-
海南三亚和文昌稻田蜻蜓目成虫群落调查分析
作者:周霞;谭燕华;易小平;伍苏然;张丽丽;郭安平
关键词:三亚;文昌;稻田;蜻蜓;种群
-
三亚南繁区稻田捕食性天敌研究
作者:周霞;谢翔;谭燕华;易小平;夏启玉;张丽丽;郭安平
关键词:南繁区;热带地区;稻田;捕食性天敌;种群动态
-
几种生防细菌对尖孢镰刀菌的抑菌效果及其相互间包容性生长的快速检测
作者:孙茜茜;李春强;易小平
关键词:生防菌;茄子枯萎病菌;香蕉枯萎病菌;尖孢镰刀菌枯萎病;包容性生长