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鸭甲肝病毒1型和3型HRM检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 董嘉文 1 ; 李林林 1 ; 张俊勤 1 ; 黄允真 1 ; 孙敏华 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽药与诊断学科群广东科学观测实验站  

关键词： 鸭甲肝病毒1型;鸭甲肝病毒3型;HRM

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2021 年 46 卷 003 期

页码： 88-91

摘要： 本研究根据鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)和3型(DHAV-3)的5′UTR基因的保守区域,设计了1对特异性的引物,扩增目的片段大小约为199 bp.通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的鸭甲肝病毒1型和鸭甲肝病毒3型的鉴别检测方法.特异性试验结果表明,该方法能特异性地检测出DHAV-1和DHAV-3,检测其它常见鸭源病毒不能形成特异性的熔解峰;敏感性和重复性试验表明,对p-DHAV-1和p-DHAV-3阳性质粒的最低检测限分别为220 copies和28 copies,对不同批次的样品扩增效果良好,具有良好的批内和批间重复性.采用该方法检测临床样品,与传统的二重PCR方法比较,符合率为100%.该方法为DHAV-1和DHAV-3的临床疑似病例的鉴别检测、快速诊断以及分子流行病学调查等提供了技术支撑.

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