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栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒cDNA文库的构建及部分序列分析

文献类型： 中文期刊

作者： 王崇明 1 ; 艾海新 1 ; 刘英杰 2 ; 王秀华 1 ; 李赟 3 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.中国水产科学研究院

3.中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室

关键词： 栉孔扇贝;急性病毒性坏死病毒;cDNA文库;克隆;序列分析

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2006 年 13 卷 03 期

页码： 421-425

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 急性病毒性坏死症病毒(Acute Virus Necrobiotic Virus,AVNV)已被证实是一种对养殖栉孔扇贝(Chlamys farreri)危害极大的致病病原。本研究应用基因克隆技术对AVNV基因组进行cDNA合成、克隆,并对部分克隆进行序列分析。采用差速和蔗糖密度梯度离心法,分离纯化AVNV。用Trizol试剂抽提病毒RNA,采用随机引物和Oligo(dT)双引物法,SuperScriptⅡ反转录酶合成cDNA,并克隆于pUC118质粒上,利用蓝白斑筛选阳性克隆子,PCR法快速鉴定重组质粒。经筛选得到2个阳性克隆23#、52#,插入片段大小约为1 200 bp和800 bp。测序结果与GenBank的比对分析显示,尚未有类似的序列报道,提示该病毒可能为一种新发现的病毒。

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[1]栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒cDNA文库的构建及部分序列分析. 王崇明,艾海新,中国海洋大学,刘英杰,王秀华,李赟,宋微波. 2005

[2]栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒基因组全序列的测定与分析. 任伟成,蔡玉勇,王崇明. 2009

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