文献类型： 中文期刊

作者： 赵小金 ¹ ; 张盛静 ¹ ; 白昌明 ² ; 岳志芹 ³ ; 王崇明 ² ; 尹伟力 ³ ; 蔡生力 ¹ ; 黄倢 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所

3.山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

关键词： 魁蚶;牡蛎疱疹病毒魁蚶株;交叉引物等温扩增;检测

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2015 年 39 卷 04 期

页码： 580-588

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立牡蛎疱疹病毒魁蚶株快速、灵敏、准确和操作简便的检测方法,实验根据已测序完成的Os HV-1-SB全基因组序列,选择其保守区域,建立了交叉引物等温扩增检测方法,并对反应温度、d NTPs、Mg2+浓度和反应时间进行了优化。结果显示,最佳温度为63℃,反应时间为60 min,d NTPs浓度为1.4 mmol/L,Mg2+浓度为6 mmol/L。该方法检测灵敏度为30拷贝的质粒DNA,并且特异性较强,与贝类常见病原急性病毒性坏死病毒、鲍鱼疱疹病毒、派琴虫、包纳米虫、马尔泰虫以及对虾白斑综合征病毒和副溶血弧菌均无交叉反应。使用实验建立的CPA检测方法对2012年分别采自韩国庆尚南道、山东长岛、辽宁大连共计22份Os HV-1-SB感染情况未知的魁蚶样品进行了检测。研究表明,实验所建立的Os HV-1-SB的CPA检测方法简单、快速、灵敏且特异性强。由于其检测结果可通过简单离心或者向反应管中加入核酸荧光染料Gene FinderTM进行肉眼观察,所以可以在沿海贝类养殖厂及条件简陋的实验室使用,具有较好的应用前景。