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鲤疱疹病毒2型与3型双重PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 陈永聪 1 ; 方勤美 1 ; 柯翎 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词： 鲤;疱疹病毒;双重PCR

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2023 年 38 卷 006 期

页码： 652-656

收录情况： CSCD

摘要： [目的]鲤疱疹病毒 2型和 3型对鲤科鱼类危害严重,本研究旨在建立快捷、高效且能同时检测 2种鲤疱疹病毒的检测技术.[方法]根据鲤疱疹病毒 2 型和 3型的DNA聚合酶基因保守序列,设计 2对特异性引物,通过对双重PCR反应条件的优化,建立检测鲤疱疹病毒 2型和 3型的双重PCR方法;使用该方法对试验室保存的鲫和鲤病鱼组织样品进行检测.[结果]该方法能够分别对鲤疱疹病毒 2型和鲤疱疹病毒 3型各扩增出 715 bp和 456 bp的特异性条带,表现出良好的特异性;敏感性试验结果显示,该方法的检测极限值为 100 copies·μL-1,具有较高的灵敏性.使用该方法对本试验室保存的 18份临床病料进行PCR检测并对PCR产物进行测序验证,结果显示CyHV-2和CyHV-3阳性的各有 3份,其阳性率都为 33.3%;分别对 2份CyHV-2和CyHV-3阳性样品混合后进行检测,结果混合样品均为CyHV-2和CyHV-3双阳性,与常规检测方法得到的结果相同.[结论]本研究建立的双重PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于CyHV-2和CyHV-3的快速检测和鉴别诊断.

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